蛋白質(zhì)染色的幾種方法?
常用的蛋白質(zhì)染色試劑分為已考馬斯亮藍為代表的有機試劑染色、銀染、熒光染色及同位素顯色。
其中考馬斯亮藍染色法的應用較為廣泛,現(xiàn)將其與其他的蛋白質(zhì)染色方法(主要是銀染法)作一比較,幫助大家更好地去選擇合適的蛋白質(zhì)染色方法。
蛋白質(zhì)的染色常用的有4類:有機試劑染色、銀染、熒光染色及同位素顯色。
其中有機試劑染色以考馬斯亮藍染色法(Coomasie brilliant blue,CBB)為代表,在蛋白質(zhì)分析中常用,但對低豐度蛋白質(zhì)的顯現(xiàn)較差;銀染靈敏度雖高,卻常與質(zhì)譜不兼容;熒光染色以SYPRO試劑為主,蛋白質(zhì)檢測靈敏度高,能兼容質(zhì)譜,但由于需要配備特殊的檢測儀器及試劑的昂貴,未被作為常規(guī)方法使用;而同位素顯色則存在安全性和操作局限性等問題。
因此,篩選簡便、節(jié)約、檢測靈敏度高、質(zhì)譜兼容的蛋白質(zhì)著色法是蛋白質(zhì)組研究所需。
由于考馬斯亮藍染色法的廣泛運用,近年來就考馬斯亮藍染色法在提高其靈敏性方面研究者們作了許多改進,方法眾多,評價不一。
我們在作雙向凝膠電泳時,將常用的幾種考馬斯亮藍染色法及銀染進行了比較,并就其染色影響因素作出分析。……詳細資料請參考:on http://www.bio1000.com/experiment/protein/351913.html
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